ABSTRACT
ABSTRACT: Aeromonas hydrophila is a common fish pathogen that causes extensive damage to aquaculture. To develop and implement a more adequate strategy to farm fish, it is crucial to understand the bacterial-resistance levels and their transference dynamics. The objective of this study was to analyze the resistance profile of isolated Aeromonas hydrophila to antimicrobial agents and heavy metals and draw a correlation of the observed profiles with the presence of plasmids. Resistance of the isolated bacteria to antimicrobial agents (oxacilin, gentamicin, tetracycline, and nalidixic acid) and heavy metals (cadmium, lead, copper, and manganese) was verified using the minimum bactericidal concentration (MBC) and minimum inhibitory concentration (MIC) standards. The Multiple Antibiotic Resistance Index (MAR Index) was calculated. Plasmids were extracted by using a common methodology described elsewhere. Mann-Whitney Test, implemented in the R environment, was used to determine the correlation between resistance and plasmids presence. A high resistance to almost all antimicrobial agents and heavy metals was observed, except to gentamicin and cadmium. The MAR index results showed resistance to all antimicrobial profiles. Of the isolated bacteria, 14 showed the presence of plasmids. However, no correlation was noted between the resistance profile and the plasmid presence for these isolates, indicating that the genes responsible for resistance to microbial agents and heavy metals are present in the cromossomic DNA, which in turn suggested the possibility of gene transfer between the isolated bacteria. The resistance to heavy metals can be linked to heavy utilization of fertilizers along the Sao Francisco River.
RESUMO: Bactérias da espécie Aeromonas hydrophila são patógenos que atacam peixes, causando grandes prejuízos à piscicultura. Entender os perfis de resistência dessa bactéria e a capacidade da mesma em transferir tal resistência é importante para implantação de um manejo adequado na produção de peixes. Os objetivos desse estudo foram analisar a resistência de isolados de Aeromonas hydrophila à antimicrobianos e metais pesados e, correlacionar os perfis encontrados com a presença de plasmídeos. A resistência dos isolados aos antimicrobianos (oxacilina, gentamicina, tetraciclina e ácido nalidíxico) e metais pesados (cádmio, chumbo, cobre e manganês) foi verificada pelas técnicas da Concentração Bactericida Mínima (CBM) e Concentração Inibitória Mínima (CIM). Foi calculado o Índice de Resistência Múltipla aos Antimicrobianos (IRMA). Os plasmídeos foram extraídos por metodologias descritas pela literatura. A relação entre a resistência aos antimicrobianos e metais pesados com a presença de plasmídeos foi determinada pelo teste de Mann-Whitney utilizando o ambiente R. Foi observada alta resistência aos antimicrobianos e metais pesados testados, com exceção à gentamicina e cádmio. No IRMA os isolados apresentaram resistência a todos os perfis de antimicrobianos possíveis. Quatorze isolados apresentaram plasmídeos, mas não foi encontrada relação dos perfis de resistência com a presença destes, o que indica que os genes de resistência a esses compostos estejam presentes no DNA cromossômico. Porém apontam a possibilidade de transferência dos genes de resistência entre os isolados. Estes resultados apontam alta resistência dos isolados e capacidade de transmissão dessa resistência a outras bactérias. A resistência aos metais pesados, pode estar ligada ao uso de fertilizantes nas plantações localizadas próximas as margens do Rio São Francisco.
ABSTRACT
This study was conducted jointly with the Municipal Sanitary Surveillance Agency of Petrolina, in the period of August-October 2013, to evaluate the hygienic-sanitary conditions of food producing and commercializing establishments in the municipality of Petrolina. A total of 300 food manufacturer/trader establishments were evaluated based on a Good Manufacturing Practices (GMP) checklist. The evaluation was based on 25 items. The data were computed as 0 for nonconformity and 1 for conformity to the GMP checklist. Data from all districts were analyzed by Principal Component Analysis (PCA). Items such as presence of lamp protectors, clean windows and screens, presence of SOP and training programs for handlers, use of aprons, caps, gloves and disposable towels, and performing periodic examinations of the establishments were evaluated. Fourteen evaluation items showed significant differences (P<0.05) for frequency of conforming and 9 for nonconforming. The PCA identified five city districts (Centro Norte, Areia Branca, Santa Luzia, Rio Corrente and São Gonçalo) in the municipality that used GMP in their establishments. These results highlight the need to redouble efforts in establishments to ensure the safety of products offered.
Este estudo foi realizado em conjunto com a Agência Municipal de Vigilância Sanitária de Petrolina, no período de agosto a outubro de 2013, para avaliar as condições higiênico-sanitárias de produção e comercialização de alimentos nos estabelecimentos municipais de Petrolina. Um total de 300 estabelecimentos fabricante/comerciante de alimentos foi avaliado com base em uma lista de verificação de Boas Práticas de Fabricação (BPF). A avaliação foi baseada em 25 itens. Os dados foram computados como 0 para a não-conformidade e 1 para a conformidade segundo a lista de verificação. As respostas para as observações foram obtidas por Análise de Componentes Principais (ACP). Itens como protetores de lâmpadas, limpeza das janelas e telas, presença de programas de higiene operacional, curso de formação para manipuladores, o uso de aventais, bonés, luvas e toalhas descartáveis e realização de exames médicos periódicos dos manipuladores foram avaliados. Quatorze itens de avaliação mostraram diferenças significativas para frequência de conformidade e 9 para não-conformidade. A ACP identificou cinco regiões da cidade (Centro Norte, Areia Branca, Santa Luzia, Rio Corrente e São Gonçalo) no município que utilizam BPF em seus estabelecimentos. Estes resultados destacam a necessidade de redobrar os esforços nos estabelecimentos para garantir a inocuidade dos produtos oferecidos.